Fig.1: Brightfield
images overlaid with cell masks (pink) and nucleus masks (yellow)
Objective: 20X, Scale bar: 100 μm.
General Analysis 3 图像分析中的Homogeneous Area Detection模块具有检测明场图像的背景均质区域的功能。使用这个功能,明视野图像的背景区域被二进制化和反转,以创建细胞区域的Mask 。荧光通道图像中的DAPI染色的细胞核区域被二进制化以创建一个细胞核Mask 2>,并使用Watershed功能进行划分3>,然后对单个细胞进行划分4>。这样就能创建细胞Mask和细胞核Mask 5>。这可以有效地利用荧光波长来分析细胞器和特定的蛋白质,而不必为只识别细胞区域而进行绿色或红色荧光染色。
材料和方法将固定在96孔板上培养的HeLa细胞、HepG2细胞和角质形成细胞(keratinocytes),用DAPI进行细胞核染色。使用Ti2-E倒置显微镜、DS-Qi2单色相机、D-LEDI荧光光源和新品 Lambda D 20x 物镜采集明场和DAPI图像,并使用NIS-Elements的General Analysis 3 创建细胞形态分析工作流。在Batch
GA3上进行图像分析,并在Microsoft Excel®中创建图表。实验结果