通常我们使用模式器官对CAR-T细胞的杀伤性进行评估，但是人力和时间成本都比较高。本文介绍一种AIMBiotech 3D 细胞培养芯片，其可构建一种简单3D细胞杀伤模型，并通过共聚焦显微镜进行体外成像和测量T细胞的免疫效应。该模型可以根据研究模拟多种场景，非常灵活。与 2D 模型相比，该测定在体外再现了细胞的更多时空动态，并能够在更多生理条件下分析免疫细胞介导的杀伤。
实验概括
我们使用AIM Biotech 的 identTx9 3D 细胞培养芯片模拟肿瘤微环境，并使用共聚焦显微镜对进行CAR-T杀伤性进行成像定量检测（Nikon AX R confocal, NIS-Elements GA3 analysis module ）。
AIM Biotech idenTx 9 包括了3个流道（图2A）。首先，在中间凝胶孔道播种混合着胶原蛋白凝胶的GFP-Hep3B细胞（图2B，左），然后将CAR-T细胞注射到旁边的孔道（图2B，中）， 最后实时拍摄CAR-T细胞穿透进入癌细胞所在孔道的过程（图2B，右）。
CAR-T 细胞引起癌细胞凋亡
CD133肿瘤特异性的CAR-T细胞在24小时内自发浸润到中肿瘤微环境中与癌细胞互作（图3）。同时癌细胞、CAR-T细胞以及剪切的caspase-3的荧光信号被捕捉并分析其信号的相关性（图4）。通过图像，我们可以得出结论，CAR-T细胞移动至癌细胞并在其周围引起细胞凋亡。
靶标CD133的CAR-T细胞具有对癌细胞具有高杀伤能力(图5)。
产品信息
AX R confocal microscope
分辨率可达8192 x 8192 pixels，具有25 mm大视野，减少光毒性，自动阴影矫正可获取亮度均匀的图片。Resonant 模式下分辨率2048×2048 pixels.
NIS-Elements 软件的GA3 analysis module可轻松实现3D 样本的测量和分析。
idenTx 9 可容纳3个独立的idenTx 3 芯片，可形成标准的SBS平板。
idenTx 9 和idenTx 3使用一样简单，并且保证了通量。
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