当一个细胞被照亮时,穿过细胞区域的光线会比通过无细胞区域的光线发生延迟。这种延迟称为“相位”,其分布反映了细胞结构。VC 是对这种“相位分布”进行成像的函数。相位分布 Φ (x, y) 可以由细胞厚度差 h (x, y)(物理厚度)和细胞折射率的变化 Δn(= n-nm) 的乘积表示。
Φ (x, y) = (2πΔn /λ)· h (x, y)。
VC 可计算和可视化来自于不同焦平面上拍摄的明场图像的多个相位分布 Φ (x, y)
特殊目标。只需一键点击即可实现容积对比图像的重建,不需要特殊的物镜、滤光块或滑片。
通常明场图像具有低的信噪比,很难通过二值化去检测细胞区域。而VC 图像,由于对于细胞比较厚的区域的像素值比较大,从而很容易识别出背景和细胞区域。因此,即使对高密度细胞的区域也很容易进行分割识别,提高细胞计数的准确率。
VC一个主要特点就是能够获取“厚度信息”,这对于传统的相差观察是困难的。与共聚焦图像类似,VC 可以分析细胞的高度差,即使细胞在垂直方向重叠,也能反映细胞结构。
应用实例
VC 可实现细胞状态的无标记定量分析,适用于药效评估。
产品信息
容积对比 (Volume contrast,VC), 此可选功能可以通过NIS-Elements 成像软件从明场图像构建类荧光图像。无需特别的光学配件,定量相位分析可以很容易实现。