本期MicaCam聚焦于斑马鱼相关研究(斑马鱼)。不同于其他哺乳动物的心脏细胞,斑马鱼的心脏细胞能够在受损之后完全再生。我们的特邀嘉宾Laura Peces-Barba Castaño来自马克思-普朗克心肺研究所,她将会分析斑马鱼心脏细胞再生过程的不同参数,比如细胞增殖。她将通过活细胞成像数据分析不同标记的心肌细胞和增殖细胞,跟踪观察修复过程中这两种细胞的反应

学习要点

  • 如何克服受损心脏组织染色和成像过程中出现的挑战
  • 如何能直观地观察并区分受损心肌细胞和增殖心肌细胞
  • 如何充分利用器官外植体成像过程和修复过程

演讲人

Laura Peces-Barba Castaño

博士在读—Stainier博士教授部门,马克思-普朗克心肺研究所

Laura拥有苏格兰阿伯丁大学的生物医药科学学位。在校期间,她还曾在弗朗西斯克里克研究所进行工业实习,对疟原虫进行研究。目前,Laura正在Stainier部门(马克斯-普朗克研究所)攻读心脏再生的博士学位,她的目标是发现导致斑马鱼心脏再生的机制。

Lynne Turnbull博士

Lynne Turnbull博士,高级应用经理——徕卡显微系统

Lynne是徕卡显微系统的一名高级应用经理。她在澳大利亚悉尼大学获得了心脏生物物理学博士学位,然后在旧金山和墨尔本接受了博士后研修训练。在去到悉尼科技大学之前,Lynne成立了微生物成像机构,并任管理层。2021年,Lynne以高级应用经理受聘加入徕卡显微系统,目前在海德堡EMBL IC就职。

观看实验

MicaCam第04集

在本集中,我们就模型生物斑马鱼受伤后心脏是如何再生的问题与嘉宾Laura Peces-Barba Castaño进行了探讨。疤痕和纤维化组织的存在是由于哺乳动物的心脏在受伤后的再生能力非常有限。但斑马鱼的心脏在严重损伤后可以再生且无疤痕形成,这使得斑马鱼成为探索心脏损伤的一个绝佳的实验工具。

Laura向我们展示了使斑马鱼心脏尖端受伤的实验过程,并对她如何处理心脏进行成像。让我们了解了怎样识别受伤和非受伤组织之间的边界区,以及这个区域是如何成为研究心脏恢复时最相关的部分。她还利用心肌细胞、增殖细胞和所有细胞的特异性染色在边界区域内形成不同的染色模式。不同的染色模式可对受伤和增殖的心肌细胞进行量化。我们的嘉宾也对心脏组织部分的处理、染色和成像时出现的一些挑战进行了描述。

MICA的样本搜寻功能能够对包含10个心脏部分的视野进行快速浏览,这是Laura最喜欢的功能,因为其可以在决定获取哪部分的图像前轻松对其进行浏览和探究。每部分单个Z轴的图像可在宽场中快速拍摄并快速查看。然后决定哪些部分适合用带或不带Z轴的共聚焦成像进一步观察。从而提高工作效率和成像时间。Laura也对在使用显微镜进行实验时可以在光线明亮的房间里而不是在阴暗潮湿的房间里而感到高兴。

取自斑马鱼心脏的单层切片显示,心室的下部区域有损伤。图像显示了所有细胞的细胞核(蓝色),心肌细胞的细胞核(心肌细胞,绿色)和增殖细胞的细胞核(红色)。图片由马克斯-普朗克心肺研究所的Laura Peces-Barba Castaño提供。